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蛋白質等電點測定實驗結論 蛋白質等電點測定實驗結果討論篇一
1,、上班前檢查油窗機油是否正常,,磨刀裝緊,,輪部注入1-2滴機油;
2,、操作工除對機器進行必要的保養(yǎng)外,,不得隨意拆卸,必須保持機器完整,;
3,、操作時必須佩帶專用的鋼絲手套;
4,、下班前必須清掃機器灰塵,;
5、嚴禁他人隨意操作,。
放布機操作規(guī)程
1,、上班前先檢查機器各部分是否正常,并加注潤滑油,;
2,、各傳動部位不準有布條等纏繞物,,發(fā)現(xiàn)有異物應及時消除,;
3,、中途離崗必須關掉電源,;
4,、下班前切斷電源,,清理檢查灰塵方可下班,。
粘合機的操作規(guī)程
1,、檢查各部位是否正常,,輸送帶內是否有雜物,,輸送帶是否清潔;
2,、開啟總電源,,開啟輸送電源前,先把調速開關低于低速位,,然后根據(jù)技術要求把速度調至適當速度,,開啟加溫調節(jié)器,,把溫度調至所需溫度;
3,、開機前把壓力調至最低,,當溫度達到溫度后,把壓力加至規(guī)定壓力,,開始工作,,操作中經(jīng)常注意輸送帶調編工作是否正常,嚴禁有產品卷入輸送帶內,;
4,、根據(jù)技術和檢驗要求,必要時對產品進行檢驗和實驗,,確認粘合結果合格后進行批量生產,;
5、生產過程中必須保持輸送帶清潔,,生產途中停電必須及時用手柄把產品從輸送帶中搖出,并使輸送帶運動一定時期進行冷卻,;
6,、生產結束先停止加溫,把壓力調至最低,,使輸送帶繼續(xù)工作一定時間至輸送帶冷卻后,,對輸送帶進行清潔保養(yǎng)后,切斷電源加上機罩,。
精裁機的操作規(guī)程及保養(yǎng)
1,、上班前先檢查機器各部分是否正常,并加注潤滑油,;
2,、操作時必須佩帶規(guī)定的專用手套;
3,、清掃機器必須切斷電源后進行,;
4、下班前必須關掉電源,,并把機器罩好,;
5、嚴禁操作工任意串崗操作,。
電鉆的操作規(guī)程及保養(yǎng)
1,、上班前檢查電鉆有無異常響聲;
2,、操作工不得任意拆卸零部件,,必須保持機器完整,;
3、下班前必須清掃機器衛(wèi)生,,電源切斷后方可下班,;
4、嚴禁他人隨意操作,。
電加熱裁布機的操作規(guī)程及保養(yǎng)
1,、上班前檢查機器各部位是否正常,并對機器進行必要的清潔,;
2,、在操作過程中發(fā)現(xiàn)異常應及時關機檢查,自己不能解決的請機修工檢查,,確認正常后方可繼續(xù)操作,;
3、中途離崗必須關掉電源,,更換電熱絲必須在關機的狀態(tài)進行,;
4、嚴禁他人操作,。
氣泵的使用及保養(yǎng)
1,、上班前必須排掉冷凝水,并檢查油窗機油是否正常,;
2,、開機后檢查聲音有無異常,檢查壓力表是否標準,;
3,、下班前必須關掉電源,清理灰塵,;
4,、嚴禁他人操作。
大燙熨斗的使用及保養(yǎng)
1,、上班前打開蒸汽進出閥門,,并排出積水;
2,、工作中發(fā)現(xiàn)異常應立即關掉進出閥門檢查,;
3、下班前將熨斗放在指定位置,;
4,、嚴禁他人隨意操作。
燙臺的使用和保養(yǎng)
1,、上班前打開電源檢查吸風電機有無異常響聲,;
2,、檢查燙臺布是否完好;
3,、下班前關閉電源并清理臺面衛(wèi)生,;
4、嚴禁串崗操作,。
大白扣使用及保養(yǎng)
1,、上班前先檢查機器各部分是否正常,并加入潤滑油,;
2,、檢查保險裝置是否正常,使用前空踩機器檢查,;
3,、下班前必須清掃機器衛(wèi)生,電源切斷后方可下班,;
4,、嚴禁他人隨意操作。
蛋白質等電點測定實驗結論 蛋白質等電點測定實驗結果討論篇二
水,、電,、辦公用品管理制度
為規(guī)范公司水、電,、辦公用品的使用,確保辦公所需,,倡導勤儉節(jié)約,、物盡其用、杜絕鋪張浪費,、大手大腳,,管好用好辦公物品,特制定本制度,。
一,、節(jié)約用水
1、自然用水將龍頭盡量開小,,用完隨手關閉,,堅決避免“長流水”現(xiàn)象發(fā)生。
2,、飲用水量身倒水,,杜絕“剩半杯”現(xiàn)象,給顧客倒水以六七分為宜,,喝完再續(xù),。飲水機一經(jīng)發(fā)現(xiàn)漏水等損壞情況立即保修,。
二、節(jié)約用電
1,、強化照明系統(tǒng)節(jié)電,。辦公時間要充分利用自然光照,在陽光充足,、室內光線好的情況下不開燈,,長時間離開辦公室或下班時要做到人走燈滅。
2,、注重用電設備節(jié)電,。各部門人員使用電腦、傳真機,、復印機等辦公自動化設備時,,盡量減少開啟和使用次數(shù),長時間不使用或下班后要徹底切斷電源,,減少辦公設備待機能耗,。
3、辦公室,、會議室等辦公區(qū)域做到無人時不開空調,,開空調時不開門窗。
三,、節(jié)約辦公用品(規(guī)定中的辦公用品分為固定資產和一般辦公用品)
1,、固定資產主要指:桌椅、公文柜,、電腦,、電話機、打印機,、飲水機,、車輛等。
2,、一般辦公用品包括剪刀,、膠帶、橡皮擦,、回形針,、直尺、訂書器,、涂改液,、裁紙刀、筆、信箋,、筆記本,、打印紙、復印紙,、復寫紙,、印泥、釘書針,、大頭針,、夾子、名片,、賬冊,、卷宗、檔案袋(盒),、標簽,、紙杯、計算器,、電池等,。
3、節(jié)約用紙,。公司鼓勵員工盡量雙面打印紙張,,一面留白廢紙應作草稿使用。
4,、公司員工請自帶飲水杯具,,一般情況下禁止使用一次性紙杯。
5,、盡量減少電話的通話時間,,盡量長話短說;禁止私人電話與辦公電話捆綁,;禁止在辦公場所用辦公電話聊天,。
6,、節(jié)約辦公用品,。保管和使用好自己的辦公用品,申領有度,。對辦公電器要注意保管和維修,,長時間不用應切斷電源,降低折舊,。
7,、辦公用品應為辦公所用,不得據(jù)為己有,不得移作他用或私用,。
8,、所有員工要勤儉節(jié)約,杜絕浪費,,不許將辦公用品隨意丟棄廢置,,努力降低消耗和辦公費用,精心使用辦公設備,。
蛋白質等電點測定實驗結論 蛋白質等電點測定實驗結果討論篇三
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等電點聚焦測蛋白質等電點 1.了解蛋白質的兩性解離性質和等電點聚焦的原理,; 2.學習測定蛋白質等電點的方法并掌握圓盤電泳技術。
二.實驗原理 等電點聚焦(ief)是在電場中分離蛋白質技術的一個重要發(fā)展,,ief 實質 就是在穩(wěn)定的 ph 梯度中按等電點的不同分離兩性大分子的平衡電泳方法,。
在電場中充有兩性載體和抗對流介質,當加上電場后,,由于兩性載體移動的 結果,,在兩極之間逐步建立起穩(wěn)定的 ph 梯度,當?shù)鞍踪|分子或其它兩性分子存 在于這樣的 ph 梯度中時,,這種分子便會由于其表面電荷在此電場中運動,,并最 終到達一個使其表面靜電荷為 0 的區(qū)帶,這時的 ph 則是這種分子的 pl,。聚焦在 等電點的分子也會不斷地擴散,。一旦偏離其等電點后,由于 ph 環(huán)境的改變,,分 子又立即得到正電荷或負電荷,,從而又向 pl 遷移。因此,,這些分子總是處于不 斷地擴散和抗擴散的平衡之中,,在 pl 處得以“聚焦”。
三.實驗步驟 1.凝膠制備 按表 1 的比例配制 4ml 工作膠液,,在真空干燥器中抽氣 10min,。每組 4 管,每管 加膠液 1.8ml,?;靹蚝罅⒓醋⑷氲揭褱蕚浜玫哪z管中,膠液加至離管頂部 1cm 處,,在膠面上再覆蓋 3mm 厚的水層,,應注意不要讓水破壞膠的表面,室溫下放置 20?30min 即可聚合,。
表 1 凝膠工作液配比 凝膠母液(丙烯酰胺 30%甲叉雙丙烯 酰胺 0.8%)
1ml 10%±硫酸銨 0.02ml 水 2.68ml 載體兩性電解液 0.15ml 蛋白樣品液 0.1ml,0.05ml temed 0.02ml 2.電泳 吸去凝膠柱表面上的水層,,將凝膠管垂直固定于圓盤電泳槽中。于電泳槽下槽加 入0.2 %的 500ml 硫酸作正極;上槽加入 0.5 %的 800ml 乙醇胺作負極打開電源,,/ 4
將電壓恒定為 300v,因為聚焦過程是電阻不斷加大的過程,,故聚焦電泳過程中,電流將不斷下降,,降至穩(wěn)定時,,即表明聚焦已完成,繼續(xù)電泳約 30min 后,,停止 電泳,,全程約需 3h。
3.剝膠
電泳結束后,,取下凝膠管,,用水洗去膠管兩端的電極液,按照柱狀電泳剝膠的方 法取出膠條,,以膠條的正極為“頭”,,負極為“尾”,正極端呈酸性,,負極端呈堿 性,。剝離后,量出并記錄凝膠的長度,。4.固定
取其中的凝膠條 3 根置于一個小培養(yǎng)皿內,,倒入 10%放在三氯乙酸固定液中固定,約半小時后,,即可看到膠條內蛋白質的白色沉淀帶,。固定完畢,倒出固定液用直 尺量出膠條長度 l i 和正極端到蛋白質白色沉淀帶中心,,即聚焦部位的長度 l 2 o 梯度的測量 切段法:將未經(jīng)固定的 1 根膠條,,按照從正極端(酸性端)到負極端(堿性端)的順 序切成相等的 10 段,按次放人有標號的,、裝有 0.0im 氯化鉀的試管中,,浸泡過 夜。然后用 ph 計測出每管浸泡液的 ph 并記錄,。
四?實驗結果 1.凝膠條的長度及染色蛋白帶的位置 凝膠條編號 1 2 3 4 固定前的長度 7.8cm 7.8cm 7.4cm 7.7cm l o
固定后的長度 7.7cm 7.8cm 7.4cm 未染色,,測 ph l 1
梯度 蛋白帶距酸端 1.3cm 1.4cm 1.3cm
距離 l 2
蛋白質距正極 1.32cm 1.4cm 1.3cm
實際長度 l s
梯度表及其相應標準曲線 標號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 長度 /cm 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 ph 值 3.05 3.72 5.04 6.76 7.24 7.99 8.62 9.58 10.1 4 10.1 8 / 4
蛋白質樣品等電點的計算:
蛋白質聚焦部位距凝膠條正極端的實際長度 =固定后的蛋白區(qū)帶中心距凝膠條正 極端的距離*固定前凝膠條長度/固定后凝膠條長度 則將上述數(shù)據(jù)代入 l f l 2 *
-l o,求出蛋白質距正極實際長度 l s 分別為 1.3cm,、1.4cm,、l i
1.3cm
o 由凝膠條 1,、2 和 3 及其相應蛋白帶距離可計算出蛋白帶距酸端的平均距 離:(1.3+1.4+1.32)/3=1.34 ②計算出蛋白質聚焦部位距凝膠條正極端的實際長度后,,直接從 ph 梯度曲線上 求出該蛋白質等電點。得出其標準公式為:y = 0.8372x + 2.6273 則待測蛋白質的等電點為 0.8372*1.34+2.6273=3.75 五?實驗分析及討論(1)實驗結果測得的樣品蛋白的等電點為 3.75,通過查常見蛋白質等電點參 考值表格可知,,其為 b-卵黃脂磷蛋白,。由于記錄凝膠長度及蛋白質距正極的距 離存在讀數(shù)誤差,所以也可能是伴花生球蛋白(3.7-5.0)o(2)
等電點聚焦測蛋白質等電點分辨率高,,可將等電點相差 0.01 — 0.02ph 單位 的蛋白質分開,。不像一般電泳易受擴散作用影響,使區(qū)帶越走越寬,;聚焦電泳則 能抵消擴散作用,,使區(qū)帶越走越窄。同時,,很稀的樣品也可以聚焦而濃縮,,實驗 操作起來也簡單方便。
(3)其存在其不足之處是在實驗操作過程當中,,讀數(shù)的取值,、樣品溶液是否含 鹽、在等電點時蛋白質是否溶解或變性,,都會影響實驗結果,。因為鹽會增大電流 量,產生熱量,;鹽分子移至兩極時,,將產生酸或堿,中和兩性電解質,。由于這些 影響因素的存在,,個人認為利用這一種方法還不足以鑒定出蛋白質種類。/ 4
附 常見蛋白質等電點參考值
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