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最新蛋白質(zhì)等電點實驗結(jié)果 蛋白質(zhì)等電點測定實驗討論(三篇)

格式:DOC 上傳日期:2023-01-11 20:39:53
最新蛋白質(zhì)等電點實驗結(jié)果 蛋白質(zhì)等電點測定實驗討論(三篇)
時間:2023-01-11 20:39:53     小編:zdfb

在日常的學(xué)習(xí),、工作,、生活中,肯定對各類范文都很熟悉吧,。相信許多人會覺得范文很難寫,?下面我給大家整理了一些優(yōu)秀范文,,希望能夠幫助到大家,我們一起來看一看吧,。

蛋白質(zhì)等電點實驗結(jié)果 蛋白質(zhì)等電點測定實驗討論篇一

為規(guī)范公司水,、電、辦公用品的使用,,確保辦公所需,,倡導(dǎo)勤儉節(jié)約、物盡其用,、杜絕鋪張浪費,、大手大腳,管好用好辦公物品,,特制定本制度,。

一,、節(jié)約用水

1、自然用水將龍頭盡量開小,,用完隨手關(guān)閉,,堅決避免“長流水”現(xiàn)象發(fā)生。

2,、飲用水量身倒水,,杜絕“剩半杯”現(xiàn)象,給顧客倒水以六七分為宜,,喝完再續(xù),。飲水機一經(jīng)發(fā)現(xiàn)漏水等損壞情況立即保修。

二,、節(jié)約用電

1,、強化照明系統(tǒng)節(jié)電。辦公時間要充分利用自然光照,,在陽光充足,、室內(nèi)光線好的情況下不開燈,長時間離開辦公室或下班時要做到人走燈滅,。

2,、注重用電設(shè)備節(jié)電。各部門人員使用電腦,、傳真機,、復(fù)印機等辦公自動化設(shè)備時,盡量減少開啟和使用次數(shù),,長時間不使用或下班后要徹底切斷電源,,減少辦公設(shè)備待機能耗。

3,、辦公室,、會議室等辦公區(qū)域做到無人時不開空調(diào),開空調(diào)時不開門窗,。

三,、節(jié)約辦公用品(規(guī)定中的辦公用品分為固定資產(chǎn)和一般辦公用品)

1、固定資產(chǎn)主要指:桌椅,、公文柜,、電腦、電話機,、打印機,、飲水機、車輛等。

2,、一般辦公用品包括剪刀,、膠帶、橡皮擦,、回形針,、直尺、訂書器,、涂改液,、裁紙刀、筆,、信箋,、筆記本、打印紙,、復(fù)印紙,、復(fù)寫紙、印泥,、釘書針,、大頭針、夾子,、名片,、賬冊,、卷宗,、檔案袋(盒)、標(biāo)簽,、紙杯,、計算器、電池等,。

3,、節(jié)約用紙。公司鼓勵員工盡量雙面打印紙張,,一面留白廢紙應(yīng)作草稿使用,。

4、公司員工請自帶飲水杯具,,一般情況下禁止使用一次性紙杯,。

5、盡量減少電話的通話時間,,盡量長話短說,;禁止私人電話與辦公電話捆綁;禁止在辦公場所用辦公電話聊天。

6,、節(jié)約辦公用品,。保管和使用好自己的辦公用品,申領(lǐng)有度,。對辦公電器要注意保管和維修,,長時間不用應(yīng)切斷電源,降低折舊,。

7,、辦公用品應(yīng)為辦公所用,不得據(jù)為己有,,不得移作他用或私用,。

8、所有員工要勤儉節(jié)約,,杜絕浪費,,不許將辦公用品隨意丟棄廢置,努力降低消耗和辦公費用,,精心使用辦公設(shè)備,。

蛋白質(zhì)等電點實驗結(jié)果 蛋白質(zhì)等電點測定實驗討論篇二

電剪刀的操作規(guī)程及保養(yǎng)

1、上班前檢查油窗機油是否正常,,磨刀裝緊,,輪部注入1-2滴機油;

2,、操作工除對機器進(jìn)行必要的保養(yǎng)外,,不得隨意拆卸,必須保持機器完整,;

3,、操作時必須佩帶專用的鋼絲手套;

4,、下班前必須清掃機器灰塵,;

5、嚴(yán)禁他人隨意操作,。

放布機操作規(guī)程

1,、上班前先檢查機器各部分是否正常,并加注潤滑油,;

2,、各傳動部位不準(zhǔn)有布條等纏繞物,發(fā)現(xiàn)有異物應(yīng)及時消除,;

3,、中途離崗必須關(guān)掉電源;

4、下班前切斷電源,,清理檢查灰塵方可下班,。

粘合機的操作規(guī)程

1、檢查各部位是否正常,,輸送帶內(nèi)是否有雜物,,輸送帶是否清潔;

2,、開啟總電源,,開啟輸送電源前,先把調(diào)速開關(guān)低于低速位,,然后根據(jù)技術(shù)要求把速度調(diào)至適當(dāng)速度,,開啟加溫調(diào)節(jié)器,把溫度調(diào)至所需溫度,;

3,、開機前把壓力調(diào)至最低,當(dāng)溫度達(dá)到溫度后,,把壓力加至規(guī)定壓力,,開始工作,操作中經(jīng)常注意輸送帶調(diào)編工作是否正常,,嚴(yán)禁有產(chǎn)品卷入輸送帶內(nèi),;

4、根據(jù)技術(shù)和檢驗要求,,必要時對產(chǎn)品進(jìn)行檢驗和實驗,,確認(rèn)粘合結(jié)果合格后進(jìn)行批量生產(chǎn);

5,、生產(chǎn)過程中必須保持輸送帶清潔,,生產(chǎn)途中停電必須及時用手柄把產(chǎn)品從輸送帶中搖出,,并使輸送帶運動一定時期進(jìn)行冷卻,;

6、生產(chǎn)結(jié)束先停止加溫,,把壓力調(diào)至最低,,使輸送帶繼續(xù)工作一定時間至輸送帶冷卻后,對輸送帶進(jìn)行清潔保養(yǎng)后,,切斷電源加上機罩,。

精裁機的操作規(guī)程及保養(yǎng)

1、上班前先檢查機器各部分是否正常,,并加注潤滑油,;

2、操作時必須佩帶規(guī)定的專用手套;

3,、清掃機器必須切斷電源后進(jìn)行,;

4、下班前必須關(guān)掉電源,,并把機器罩好,;

5、嚴(yán)禁操作工任意串崗操作,。

電鉆的操作規(guī)程及保養(yǎng)

1,、上班前檢查電鉆有無異常響聲;

2,、操作工不得任意拆卸零部件,,必須保持機器完整;

3,、下班前必須清掃機器衛(wèi)生,,電源切斷后方可下班;

4,、嚴(yán)禁他人隨意操作,。

電加熱裁布機的操作規(guī)程及保養(yǎng)

1、上班前檢查機器各部位是否正常,,并對機器進(jìn)行必要的清潔,;

2、在操作過程中發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)及時關(guān)機檢查,,自己不能解決的請機修工檢查,,確認(rèn)正常后方可繼續(xù)操作;

3,、中途離崗必須關(guān)掉電源,,更換電熱絲必須在關(guān)機的狀態(tài)進(jìn)行;

4,、嚴(yán)禁他人操作,。

氣泵的使用及保養(yǎng)

1、上班前必須排掉冷凝水,,并檢查油窗機油是否正常,;

2、開機后檢查聲音有無異常,,檢查壓力表是否標(biāo)準(zhǔn),;

3、下班前必須關(guān)掉電源,,清理灰塵,;

4,、嚴(yán)禁他人操作。

大燙熨斗的使用及保養(yǎng)

1,、上班前打開蒸汽進(jìn)出閥門,,并排出積水;

2,、工作中發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)立即關(guān)掉進(jìn)出閥門檢查,;

3、下班前將熨斗放在指定位置,;

4,、嚴(yán)禁他人隨意操作。

燙臺的使用和保養(yǎng)

1,、上班前打開電源檢查吸風(fēng)電機有無異常響聲,;

2、檢查燙臺布是否完好,;

3,、下班前關(guān)閉電源并清理臺面衛(wèi)生;

4,、嚴(yán)禁串崗操作,。

大白扣使用及保養(yǎng)

1、上班前先檢查機器各部分是否正常,,并加入潤滑油,;

2、檢查保險裝置是否正常,,使用前空踩機器檢查,;

3、下班前必須清掃機器衛(wèi)生,,電源切斷后方可下班,;

4、嚴(yán)禁他人隨意操作,。

蛋白質(zhì)等電點實驗結(jié)果 蛋白質(zhì)等電點測定實驗討論篇三

/ 4

等電點聚焦測蛋白質(zhì)等電點 1.了解蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)和等電點聚焦的原理,; 2.學(xué)習(xí)測定蛋白質(zhì)等電點的方法并掌握圓盤電泳技術(shù)。

二.實驗原理 等電點聚焦(ief)是在電場中分離蛋白質(zhì)技術(shù)的一個重要發(fā)展,,ief 實質(zhì) 就是在穩(wěn)定的 ph 梯度中按等電點的不同分離兩性大分子的平衡電泳方法,。

在電場中充有兩性載體和抗對流介質(zhì),,當(dāng)加上電場后,,由于兩性載體移動的 結(jié)果,在兩極之間逐步建立起穩(wěn)定的 ph 梯度,,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)分子或其它兩性分子存 在于這樣的 ph 梯度中時,,這種分子便會由于其表面電荷在此電場中運動,,并最 終到達(dá)一個使其表面靜電荷為 0 的區(qū)帶,這時的 ph 則是這種分子的 pl,。聚焦在 等電點的分子也會不斷地擴散,。一旦偏離其等電點后,由于 ph 環(huán)境的改變,,分 子又立即得到正電荷或負(fù)電荷,,從而又向 pl 遷移。因此,,這些分子總是處于不 斷地擴散和抗擴散的平衡之中,,在 pl 處得以“聚焦”。

三.實驗步驟 1.凝膠制備 按表 1 的比例配制 4ml 工作膠液,,在真空干燥器中抽氣 10min,。每組 4 管,每管 加膠液 1.8ml,?;靹蚝罅⒓醋⑷氲揭褱?zhǔn)備好的凝膠管中,膠液加至離管頂部 1cm 處,,在膠面上再覆蓋 3mm 厚的水層,,應(yīng)注意不要讓水破壞膠的表面,室溫下放置 20?30min 即可聚合,。

表 1 凝膠工作液配比 凝膠母液(丙烯酰胺 30%甲叉雙丙烯 酰胺 0.8%)

1ml 10%±硫酸銨 0.02ml 水 2.68ml 載體兩性電解液 0.15ml 蛋白樣品液 0.1ml,0.05ml temed 0.02ml 2.電泳 吸去凝膠柱表面上的水層,,將凝膠管垂直固定于圓盤電泳槽中。于電泳槽下槽加 入0.2 %的 500ml 硫酸作正極,;上槽加入 0.5 %的 800ml 乙醇胺作負(fù)極打開電源,,/ 4

將電壓恒定為 300v,因為聚焦過程是電阻不斷加大的過程,故聚焦電泳過程中,,電流將不斷下降,,降至穩(wěn)定時,即表明聚焦已完成,,繼續(xù)電泳約 30min 后,,停止 電泳,全程約需 3h,。

3.剝膠

電泳結(jié)束后,,取下凝膠管,用水洗去膠管兩端的電極液,,按照柱狀電泳剝膠的方 法取出膠條,,以膠條的正極為“頭”,負(fù)極為“尾”,,正極端呈酸性,,負(fù)極端呈堿 性,。剝離后,量出并記錄凝膠的長度,。

4.固定

取其中的凝膠條 3 根置于一個小培養(yǎng)皿內(nèi),,倒入 10%放在三氯乙酸固定液中固定,約半小時后,,即可看到膠條內(nèi)蛋白質(zhì)的白色沉淀帶,。

固定完畢,倒出固定液用直 尺量出膠條長度 l i 和正極端到蛋白質(zhì)白色沉淀帶中心,,即聚焦部位的長度 l 2 o 梯度的測量 切段法:將未經(jīng)固定的 1 根膠條,,按照從正極端(酸性端)到負(fù)極端(堿性端)的順 序切成相等的 10 段,按次放人有標(biāo)號的,、裝有 0.0im 氯化鉀的試管中,,浸泡過 夜。然后用 ph 計測出每管浸泡液的 ph 并記錄,。

四?實驗結(jié)果 1.凝膠條的長度及染色蛋白帶的位置 凝膠條編號 1 2 3 4 固定前的長度 7.8cm 7.8cm 7.4cm 7.7cm l o

固定后的長度 7.7cm 7.8cm 7.4cm 未染色,,測 ph l 1

梯度 蛋白帶距酸端 1.3cm 1.4cm 1.3cm

距離 l 2

蛋白質(zhì)距正極 1.32cm 1.4cm 1.3cm

實際長度 l s

梯度表及其相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線 標(biāo)號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 長度 /cm 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 ph 值 3.05 3.72 5.04 6.76 7.24 7.99 8.62 9.58 10.1 4 10.1 8 / 4

蛋白質(zhì)樣品等電點的計算:

蛋白質(zhì)聚焦部位距凝膠條正極端的實際長度 =固定后的蛋白區(qū)帶中心距凝膠條正 極端的距離*固定前凝膠條長度/固定后凝膠條長度 則將上述數(shù)據(jù)代入 l f l 2 *

-l o,求出蛋白質(zhì)距正極實際長度 l s 分別為 1.3cm,、1.4cm,、l i

1.3cm

o 由凝膠條 1、2 和 3 及其相應(yīng)蛋白帶距離可計算出蛋白帶距酸端的平均距 離:(1.3+1.4+1.32)/3=1.34 ②計算出蛋白質(zhì)聚焦部位距凝膠條正極端的實際長度后,,直接從 ph 梯度曲線上 求出該蛋白質(zhì)等電點,。

得出其標(biāo)準(zhǔn)公式為:y = 0.8372x + 2.6273 則待測蛋白質(zhì)的等電點為 0.8372*1.34+2.6273=3.75 五?實驗分析及討論(1)實驗結(jié)果測得的樣品蛋白的等電點為 3.75,通過查常見蛋白質(zhì)等電點參 考值表格可知,,其為 b-卵黃脂磷蛋白,。由于記錄凝膠長度及蛋白質(zhì)距正極的距 離存在讀數(shù)誤差,所以也可能是伴花生球蛋白(3.7-5.0)o(2)

等電點聚焦測蛋白質(zhì)等電點分辨率高,,可將等電點相差 0.01 — 0.02ph 單位 的蛋白質(zhì)分開,。不像一般電泳易受擴散作用影響,使區(qū)帶越走越寬,;聚焦電泳則 能抵消擴散作用,,使區(qū)帶越走越窄。同時,,很稀的樣品也可以聚焦而濃縮,,實驗 操作起來也簡單方便。

(3)其存在其不足之處是在實驗操作過程當(dāng)中,,讀數(shù)的取值,、樣品溶液是否含 鹽、在等電點時蛋白質(zhì)是否溶解或變性,,都會影響實驗結(jié)果,。因為鹽會增大電流 量,,產(chǎn)生熱量,;鹽分子移至兩極時,,將產(chǎn)生酸或堿,中和兩性電解質(zhì),。由于這些 影響因素的存在,,個人認(rèn)為利用這一種方法還不足以鑒定出蛋白質(zhì)種類。/ 4

附 常見蛋白質(zhì)等電點參考值

第電點 實 m 質(zhì) sffe

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