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清腦通竅中藥組方 清腦的中成藥篇一

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waters 2695高效液相色譜儀,，2696pda檢測器，自動(dòng)進(jìn)樣,；1100lc-msd-trap-xct/plus型液質(zhì)聯(lián)用儀 （美國agilent公司）,；sartorious bt 25s型1/100000電子分析天平（北京賽多利斯儀器有限公司）；kq-500de型超聲波清洗器（昆山超聲儀器有限公司）,；ql-901漩渦混和機(jī)（其林貝爾儀器制造公司）,；臺(tái)式高速離心機(jī)（軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)儀器廠）,，勻漿機(jī)。

梔子苷,，人參皂苷rg1，人參皂苷rb1及三七皂苷r1對照品均購自中國藥品生物制品檢定所（批號分別為：110749-200309,，110703-200322,，110745-200312，110704-200318）,；人參皂苷re,，galioside，6α－h(huán)ydroxygeniposide,，3,3',5,5'-四甲氧基-4,4'-二-β-d-葡萄糖雙環(huán)氧木脂素,，6″－對香豆酰龍膽京尼平雙糖苷，藏紅花酸-1-葡萄糖（6-1）葡萄糖苷,，京尼平龍膽雙糖苷,，2α，3β,，19α,，23-四羥基齊墩果-12-烯-28-酸，人參皂苷rb2,，rb3,，rh1、rf,，rc,，rg2，rg3,，rd及三七皂苷fa,，r4，r7及 f2對照品由北京中醫(yī)藥大學(xué)石任兵教授課題組提供,。

乙腈（fisher公司）,，色譜純；屈臣氏重蒸水（液相用水）,；milli-q系統(tǒng)純化水（液質(zhì)用水）,；肝素、水合氯醛及甲酸為分析純,，均購自北京北化精細(xì)化學(xué)品有限責(zé)任公司,。cleanert c18 spe固相萃取柱（3 ml，200 mg,，60 μm,，北京艾杰爾科技有限公司）實(shí)驗(yàn)對象：sd大鼠：體重（300±10）g,，雄鼠［北京市維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，許可證編號：scxk（京）2007－0001］,。

2.1 給藥劑量及腦組織處理方法單劑量灌服清腦宣竅有效部位（6.0 g/kg）,；灌服清腦宣竅有效部位后1 h取出大腦，吸干水分,，精密稱重,，加入腦重量兩倍體積的生理鹽水。以18 000 r/min勻漿,，勻漿液加入兩倍體積的分析甲醇,，渦旋振蕩10 min,混合液在6 000 r/min下離心20 min,取出上清液。殘?jiān)偌尤雰杀扼w積甲醇渦旋振蕩10 min, 6 000 r/min下離心20 min,兩次上清液混合,，常溫減壓回收至干,。殘?jiān)? ml液相水溶解，超聲振蕩,，上spe固相萃取柱,，先用水洗脫3 ml，再用甲醇洗脫2 ml,，收集甲醇洗脫液,，常溫減壓干燥，殘?jiān)蛹状?00 μl 漩渦溶解,，即得供試品溶液,。

2.2 hplc-ms條件色譜柱：

agilent eclipse xdb-c18（4.6 mm×250 mm，5 μm）,；保護(hù)柱：eclipse xdb-c18,；柱溫：30℃；流速：1.0 ml /min,；檢測波長：203,，238nm；乙腈（a）-酸水（b）二元梯度洗脫,，梯度為：5%a17 min →16%a23 min →16%a28 min →20%a34 min →22%a50 min →30%a65 min →45%a80 min →100%a,。1100lc-msd-trap-xct/plus型液質(zhì)聯(lián)用儀：質(zhì)譜（ms）條件：esi離子源；離子源溫度350℃,；毛細(xì)管電壓：3 000 ev,；負(fù)離子檢出模式；霧化氣壓力：60 psi,；干燥氣：n2,；流速：12 l/min；掃描范圍：200～1 800 m/z。

傳統(tǒng)中藥研究與現(xiàn)代分析技術(shù)手段結(jié)合,，是中藥現(xiàn)代化的必須［7］,。一個(gè)療效確切的復(fù)方進(jìn)入人體內(nèi)的成分譜中多數(shù)成分是否存在對疾病的`多靶點(diǎn)基因表達(dá)的調(diào)控作用，必須建立在確認(rèn)該成分（代謝產(chǎn)物）在靶器官內(nèi)是否存在的基礎(chǔ)上,，再進(jìn)行體內(nèi)外藥效學(xué)研究,。

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