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水產(chǎn)動物疾病診斷技術就業(yè)前景篇一

姓

名

醫(yī)保證號

主要病史及治療經(jīng)過

診斷部門

意見

縣醫(yī)保專委會意見

性別

年

齡

人員類別

單位名稱

醫(yī)師簽字： 年

月

日

醫(yī)師簽字： 年

月

日

（章）

****年**月**日

縣醫(yī)保中心審批意見

審核簽字： 年 月 日

負責人簽字： 年 月 日

注：⒈此表由基本醫(yī)療保險特殊疾病診斷機構相應專科副主任以上的醫(yī)師填寫,。⒉“主要病史及治療經(jīng)過”應簡要記錄病史,、癥狀、體征及輔助檢查結果和治療

經(jīng)過,。

⒊“診斷部門意見”一欄要明確疾病的名稱,、分期、分型及并發(fā)癥診斷書,。

水產(chǎn)動物疾病診斷技術就業(yè)前景篇二

認知水產(chǎn)動物 教學設計

河南師范大學水產(chǎn)學院 胡佩軍

一,、教學分析

（一）、教材的地位和作用：

本節(jié)課的教學內(nèi)容是河北版《生物學》七年級上冊第一單元第三章第三節(jié)第一部分——《水產(chǎn)動物》,。這部分內(nèi)容,，從它與人類的生產(chǎn)、生活的聯(lián)系看,，講的是水產(chǎn)動物,；但從動物的形態(tài)、結構、生理特點等方面看,，主要是以鯽魚為例,，學習魚類的主要特征。并通過魚類和蝦,、蟹等的對比,，引出脊椎動物和無脊椎動物的概念,。所有這些都是學習后面各脊椎動物的基礎,。同時也為學習下一章內(nèi)容-物種的多樣性鋪墊了必要的知識。

（二）,、教學目標：

知識性目標：

1,、理解魚類適于水中生活的形態(tài)結構和生理特點。

2,、總結魚類的主要特征

3,、區(qū)別脊椎動物和無脊椎動物

技能性目標：嘗試探究性學習方法。

情感性目標：

1,、體驗與人合作,、交流及取得成果的情感。

2,、形成動物體的形態(tài)結構,、生理機能與其生活習性、生活環(huán)境相適應的基本生物學觀點,。

3,、關注水產(chǎn)動物的生存環(huán)境

（三）、教學的重點,、難點及確立的依據(jù)

教學重點：

1.鯽魚與水中生活相適應的形態(tài),、結構、生理特點,。

2.魚類的主要特征,。確立依據(jù)：鯽魚與其生活習性相適應的形態(tài)、結構,、生理特點是掌握魚類的主要特征的基礎,，而這兩部分又為學習后面的各脊椎動物奠定了基礎。同時,，利于學生理解魚類在進化上所處的位置,，所以這兩部分知識應確定為重點。

教學難點：

1,、鰓的結構及鰓內(nèi)氣體交換的過程,。

2、探究魚鰭功能的實驗中“做出假設”和“設計實驗”兩個部分。確立依據(jù)：鯽魚的呼吸器官：鰓的結構——鰓絲,、鰓耙,、鰓弓，對學生來說不僅陌生,，而且三者之間的關系不易搞清楚,。鯽魚的氣體交換過程較為復雜學生理解起來有困難，所以鰓的結構及氣體交換的過程應確定為本節(jié)的難點,。

關于鯽魚各種鰭的作用的探究實驗,，是學生學習生物學以來的第一個探究活動，而且各鰭的作用不盡相同,，又相互協(xié)作,，較為復雜，所以,，從提出假設到設計實驗都是難點,，需要教師耐心細致的指導、引導,。

（四）,、教材處理：

根據(jù)教材的重點、難點以及七年級學生的認知特點等實際情況,，這部分內(nèi)容分兩課時講解,。第一課時學習魚類的特征、脊椎動物和無脊椎動物的區(qū)別,、水產(chǎn)動物及其生存狀況等,。第二課時做探究實驗，探究魚在水中游泳時各種鰭的作用,。下面主要說明的是第一課時的教學方法及教學過程,。

二、教學方法及手段：

利用實物觀察及多媒體演示等,，創(chuàng)設形象,、生動的教學氛圍。同時,，應用講述,、啟發(fā)、分析,、討論,、比較等方法，引導學生思考一系列問題,，使他們積極地參與到教學當中去,。在獲得知識的同時，培養(yǎng)學生的觀察、比較和總結能力,。

三,、學情分析及學法指導：

（一）、學情分析：學生的觀察能力欠強,，需要在教學中加強其觀察能力以及表達所觀察到事物的能力的培養(yǎng),；學生的邏輯思維能力欠強，需要及時引導學生進行歸納,、總結,，但卻聰明好動、思維敏捷,，對觀察,、實驗等充滿好奇,。因此,，通過學生親自觀察、動手操作,，可激發(fā)學生的學習興趣,，培養(yǎng)學生的自主學習能力。

（二）,、學法指導：本節(jié)課結合學生實際情況可以給學生提供以下4種機會,使學生積極主動地參與到教學活動當中去,。

(1)提供觀察思考的機會(2)提供探究、嘗試,、合作的機會(3)提供表達,、交流的機會(4)提供成功的機會

四、課前準備：

透明魚缸,、活鯽魚,、放大鏡以及電腦課件：(1)鯽魚的身體分部(2)鰓的結構(3)鯽魚呼吸的生理過程

五、具體教學過程

（一）問題導入：從課題入手,，提出問題：什么是水產(chǎn)動物呢,？大多數(shù)學生可能回答“生活在水中的就是水產(chǎn)動物”，這時老師通過強調(diào)其經(jīng)濟價值明確水產(chǎn)動物不同于水生動物,，它是專指生活在水中的,，對人類有一定的經(jīng)濟價值的野生或養(yǎng)殖動物，通過這種啟發(fā)和對比非常的利于學生對概念的理解和掌握,。接著讓同學舉出幾種常見的水產(chǎn)動物的實例,，在學生回答的基礎上教師介紹“在水產(chǎn)動物中，魚類是個大家族”,，從而引出今天我們要重點學習的最常見的一種淡水魚類——鯽魚,。設計意圖：通過對比明確概念，通過舉例調(diào)動學生積極性、活躍課堂氣氛,，為下一步的學習打下良好的基礎,。

（二）觀察鯽魚：1.觀察外部形態(tài) 2.觀察鰓的結構以及鯽魚的呼吸(1)觀察鯽魚的外部形態(tài)

首先設置思考問題（課件展示）：鯽魚與水生生活環(huán)境相適應的形態(tài)特點有哪些？為什么,？

因為這部分內(nèi)容是教學的重點,，但由于對鯽魚的生活習性和外部形態(tài)，學生是有一定的感性認識的,，所以難度不大,。采用的教學方法是：第一步分組觀察、合作探究,；第二步學生小結,、教師補充；第三部步師生共同總結,。

第一步： 事先準備好活鯽魚（放于透明的魚缸）,，請學生分組進行觀察。觀察時,，提示學生觀察的順序,，以及側重觀察體形、體色,、體表,、感覺器官、運動器官等,，再進而用手抓一下,，看看有什么感覺？（同時學生可以參看課本中圖）學生觀察思考,，分析討論,，教師到各組巡視并與學生交流。

設計意圖：這種小組合作,、探究式的學習形式,，把學生的被動接受變?yōu)橹鲃犹骄浚膳囵B(yǎng)學生的團結協(xié)作,、共同探索的意識,。第二步：

在教師的引導下，由學生進行小結,。接著教師做必要的補充：如關于鯽魚的感覺器官,，學生可能答出眼等的特點，但對其特點,、作用一般不太了解,。這時教師指出魚沒有眼瞼,，高度近視，耳只有內(nèi)耳聽覺范圍很小,，鼻孔的主要作用是嗅覺作用,，可通過嗅覺尋找食物。并進一步設疑：魚類大多生活在比較復雜的水環(huán)境中,，它們是如何繞開那些險灘和暗礁的呢,？這時會有一部分同學推測是側線，但對側線又不太了解,，就要及時組織同學觀察側線的位置,，并用放大鏡看清側線鱗上的小孔，然后進一步講解正是這些鱗片上的小孔排列成行形成了側線,，它的主要作用是感知水溫,、水流和測定水的方位，它是適應水中生活的又一個比較重要的感覺器官,。接著教師演示鯽魚的外形圖,，重點顯示鰓蓋后緣和肛門兩處分界線的位置，使學生能正確區(qū)分鯽魚的頭部,、軀干部和尾部,，有助于學習理解鯽魚身體分部較少，軀干部和尾部肌肉發(fā)達并生有各種鰭,，比較利于它在水中游泳。

設計意圖:學生小結培養(yǎng)了學生的表達交流的能力,；教師的補充講解彌補了自主探究活動所獲得知識不夠全面這一不足,，增加了學生的知識儲備,。

第三步：

師生共同總結如下鯽魚適于水中生活的形態(tài)特點：

體形：背部青黑色,，腹面灰白色，不易被敵害發(fā)現(xiàn),，為保護色 體色：梭形,，減少水中的阻力,，適于游泳

體表：有鱗片，起保護作用,，鱗片上有粘液,，游泳時減少阻力 鰭：是鯽魚的運動器官

側線：感知水溫、水流,，測定水的方位

身體分部：分為頭,、軀干、尾三部分,，鰓蓋后之前為頭部,，肛門以后為尾部,，中間部分為軀干部。設計意圖:總結出的這些內(nèi)容是對所學知識系統(tǒng),、直觀的再現(xiàn),，符合學生的認知特點，便于學生記憶,，同時培養(yǎng)了學生的總結能力,。

在第一個探究活動剛剛結束、學生的學習興趣正濃的情況下,，進一步提出：除了形態(tài)特點,，適于水中生活的還有結構和功能上的特點，從而導入下一個學習內(nèi)容,。

2,、觀察鰓的結構和鯽魚的呼吸

3、課件展示思考問題：①觀察鯽魚的口和鰓蓋是怎樣相互配合動作的,？有什么意義,？②鯽魚的呼吸器官是什么？③鯽魚是如何通過鰓完成呼吸的,？這三個問題是這部分的關鍵問題,，也是難點問題。

4,、為了突破這些重點,、難點，我采用的教學方法是：觀察推測,、課件展示,、分析總結。

5,、首先針對第一個問題組織學生仔細觀察魚在“吞水”的過程中,，口和鰓蓋的變化情況，當鯽魚緩慢游動時,，可以在靠近魚的口前方滴幾滴紅墨水（不許多）,，然后仔細觀察水是從哪里流出來，學生很快會發(fā)現(xiàn)口和鰓蓋的交替開閉情況以及水的流入和流出方向,，從而推測魚不停地吞水,，可能就是在不斷地呼吸。

6,、及時引到第二個問題：鯽魚的呼吸器官是什么,？許多學生都能憑生活常識說出是鰓。但是鰓是什么樣的,？它有什么特點適于氣體交換呢,？大家都不太清楚,，教師展示課件：鰓的結構。通過鰓的結構圖就很容易講清鰓有鰓弓,、鰓耙和并列的兩個鰓片組成,，而鰓片又是由許多鰓絲組成的，鰓絲之所以是鮮紅色,，是因為它里面有豐富的毛細血管,，這也正是它適于氣體交換的結構特點。

7,、在此基礎上進一步提出第三個問題：鯽魚是如何通過鰓完成呼吸的,？在指導學生閱讀小辭典的前提下，播放鯽魚的鰓呼吸的連續(xù)動畫過程,，最后在教師的引導下由學生總結出如下內(nèi)容：

8,、氧氣

9、含氧較多的水 口 鰓絲中毛細血管

10,、二氧化碳

11,、含二氧化碳較多的水 鰓孔

12、設計意圖：通過問題的層層遞進,，靜,、動態(tài)課件的演示，使得復雜問題具體化,，抽象問題形象化,，較輕松地突破了教學的難點

（三）總結魚類的主要特征

教學方法：在教師的引導下由學生自己總結。設計意圖：這樣既能反映出學生對前面所學內(nèi)容的理解程度,，又能很好地培養(yǎng)學生的歸納,，總結能力。

（四）通過比較,，區(qū)別脊椎動物和無脊椎動物

13、教學方法：采取鯽魚和其他水產(chǎn)動物對蝦,、河蟹等對比,，引導內(nèi)學生自己總結脊椎動物和無脊椎動物的概念。

14,、設計意圖：通過對比,，引出脊椎動物和無脊椎動物?？梢约由顚W生對概念的理解和掌握,。教給學生學會對比的學習和記憶方法。

15,、（五）關注水產(chǎn)資源的生存環(huán)境

16,、教學方法：通過布置學生課前自己去搜集一些由于水污染造成水產(chǎn)資源受到破壞的事例,，課上指導學生閱讀（實際用）等，深入理解水產(chǎn)資源的生存現(xiàn)狀及保護措施,。設計意圖：提高學生對水產(chǎn)資源的保護意識的同時,，鍛煉學生的實踐能力。

17,、（六）,、反饋練習

課件展示習題內(nèi)容，學生當堂答題,，教師點評,。

設計意圖：通過這兩道重點習題，可及時反饋教學效果,，做到查缺補漏,，加強學生對所學知識的理解和應用。

〈課后反思〉 實踐證明,，在教學中能否引導學生進入一種最佳的學習情境,，是教學成敗的關鍵。在講授魚類適于水中生活的形態(tài)特征時,，將知識傳授與學生的探究活動結合起來,，充分調(diào)動了學生的自主性、主動性,，使他們在一次次解難中感受學習的快樂,，學會與人合作的方法。在講授鰓的結構及呼吸過程時,，應用多媒體課件輔助教學,，把復雜的問題簡單化，把抽象問題形象化,，動中有靜,、靜中有動，給學生創(chuàng)設了一個良好的學習氛圍,，激發(fā)了學生的學習興趣,，使他們積極主動地參與到教學中，從而大大提高了課堂教學效果,。

水產(chǎn)動物疾病診斷技術就業(yè)前景篇三

1.水產(chǎn)動物病害學：是研究水產(chǎn)經(jīng)濟動物病害發(fā)生的病因,，致病機理，流行規(guī)律,，以及診斷技術,，預防措施和治療方法的科學。

2.發(fā)病的原因：a,，病原的侵害,；b,，非正常的環(huán)境因素，c營養(yǎng)不良d動物本身先天的或遺傳的缺陷,，e機械損傷

3.水產(chǎn)病害綜合預防措施 1）徹底清池

2）保持適宜的水深和優(yōu)良的水質(zhì) 及水色 3）放養(yǎng)健壯的種苗和適宜的安度 4）餌料應質(zhì)優(yōu)量適 5）改善生態(tài)環(huán)境

6）操作細心

7）經(jīng)常進行檢查

8）在日常管理工作中要防止病原傳播 9）訂立和嚴格執(zhí)行檢疫制度 10）藥物預防 11）人工免疫 12）德育抗病力強的苗種

4.病毒的增殖復制步驟：吸附,、穿入和脫殼；增殖,；裝配與釋放 5.病毒的傳播方式：水平傳播和垂直傳播

6.病毒的致病機制：頓挫感染,、溶細胞感染和非溶細胞感染 病毒感染類型：急性感染、慢性感染,、潛伏感染,、慢發(fā)病毒感染

7.細菌的生長繁殖：基本條件：充足的營養(yǎng)物質(zhì)、合適的酸堿度,、適宜的溫度,、必要的氣體環(huán)境 8.細菌的感染途徑：接觸感染、創(chuàng)作感染,、消化道感染

9.細菌的感染類型：隱性感染,、潛伏感染、帶菌狀態(tài),、顯性感染 10.四類型：毒血癥,、菌血癥、敗血癥,、毒毒血癥 11.什么是真菌：真菌的生長繁殖：

真菌的致病性：致病性真菌感染,，條件致病性真菌感染、真菌性中毒

12.寄生：有的在某一部分或全部生活過程中,，必須生活于另一生物之體表或體內(nèi),，奪取該生物之營養(yǎng)而生存，或以該生物之體液及組織為食物來維持其本身的生存并對該生物發(fā)生危害作用,，此種生活方式 13.寄生生活的起源：由共生方式到寄生,，由自由生活經(jīng)過專性寄生到真正寄生。14.寄主種類：終末寄主,，中間寄主,，保蟲寄主。15.寄生蟲的感染方式：經(jīng)口感染,，經(jīng)皮感染：（主動經(jīng)皮感染、被動經(jīng)皮感染）

16.外界環(huán)境對寄生蟲的影響：水分化學因子的影響,，季節(jié)變化的影響,，人為因子的影響，密度因子的影響,，散布因子的影響

17.免疫包括以下三個方面：免疫防御,、自身穩(wěn)定,、免疫監(jiān)視

18.免疫細胞的種類：t細胞、b細胞,、nk細胞,、單核吞噬細胞、其他免疫細胞,。這5種的功能了解

19.抗原：是指凡能刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性免疫應答,，并能與相應的免疫應答產(chǎn)物如抗體和致敏淋巴細胞在體內(nèi)外結合的物質(zhì)

20.構成抗原的條件：異物性、分子大小,、化學組成和結構,、物理性狀 21.抗原決定簇（ad）：是存在于抗原物質(zhì)表面的、能夠決定抗原特異性的特殊化學基團,。也稱表位 22.免疫球蛋白：是指具有抗體活性或化學結構與抗體相似的球蛋白 23.抗體ab:是指機體免疫細胞被抗原刺激后,，由分化成熟的漿細胞 合成分泌的一類能與相應抗原特異性結合的球蛋白

抗體都是免疫球蛋白

24.免疫球蛋白 的生物學活性：與抗原特異性結合、激活補休,、調(diào)理作用,、參與機體免疫功能的調(diào)節(jié)、免疫球蛋白的免疫原性

25.非特異性免疫與特異性免疫：都是細胞防御和體液免疫 26.細胞免疫和體液免疫的基本特點是如何,？

27.特異性免疫應答的過程 ：感應階段,、反應階段、效應階段 28.細胞免疫和體液免疫的基本特點如何,？

29.包括以促進動物生長,、系列和提高動物生產(chǎn)性能，促進畜牧業(yè),、水產(chǎn)業(yè)及生產(chǎn)的一類物質(zhì),，研究藥物全部知識的科學稱為藥物學

30.副反應：是指藥物在治療劑量內(nèi)的與治療目的無關的作用。毒性反應：是指藥物在治療劑量過大或用藥時間過久,，蓄積過多導致藥理作用的延伸和加重而產(chǎn)生對機體的危害性反應

31.藥物在體內(nèi)的基本過程

吸收：指用藥部位運轉到血液的過程 分布：藥物吸收后隨血液循環(huán)向全身分布

代謝：多數(shù)藥物在體內(nèi)會經(jīng)過氧化,，還原、分解或結合等不同方式進行轉化,，使藥理作用減弱或消失

排泄：排泄是藥物的最終消失方式

32.半衰期：血藥濃度下降一半的時間稱為消除半衰期 33.充血：器官或局部組織的血管內(nèi)血液含量增多 出血：血液流出心臟或血管之外

梗死：由于動脈血流斷絕,，局部缺血引起的壞死 水腫：等滲性體液在細胞間隙積聚過多

萎縮：發(fā)育成熟的器官、組織或細胞發(fā)生體積縮小的過程

變性 ：是指細胞或細胞間質(zhì)內(nèi),，出現(xiàn)各種異常物質(zhì)或原有正常物質(zhì)的異常增多 細胞腫脹：指細胞內(nèi)水分增多,，胞體增大。胞漿內(nèi)出現(xiàn)微細顆?；虼笮〔坏鹊乃?脂肪變性：細胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)脂滴或脂滴增多 壞死：活體內(nèi)局部組織或細胞的死亡稱為壞死

34.代償種類：代謝性代償,、功能性代償、結構性代償 35.創(chuàng)傷愈合的一期、二期特點：

一期：創(chuàng)緣整齊,，組織缺損少,，沒有感染傷口。傷口炎癥反應輕,，血凝塊少,，愈合時間短，形成疤痕小

二期：創(chuàng)傷組織缺損大,，創(chuàng)緣不整齊,，口多開，壞死組織多,，出血較嚴重,，伴有感染和明顯炎癥。愈合時間長,，疤痕較大

36.炎癥：機體對致炎因素的局部操作所產(chǎn)生的具有防御意義的應答性反應 37.炎癥原因：生物性因素,、物理性因素、化學性因子,、異常免疫反應,、炎癥的結局：痊愈、遷延不愈轉為慢性炎癥,、蔓延擴散 膿毒敗血癥,、敗血癥、毒血癥,、菌血癥

38.腫瘤：是機體在各種致瘤因素作用下,，局部易感細胞 發(fā)生異常的反應性增生所形成的新生物 39.第 112頁良性腫瘤與惡性腫瘤的區(qū)別

40.鱖魚虹彩病毒：病原體：傳染性脾腎壞死病毒 41.對蝦白斑癥病毒：病原：白斑癥病毒

42.打印病：又名腐皮病,，點狀氣單胞菌點狀亞種,。癥狀：魚種和成魚患病的部位通常在肛門附近的兩側，或尾鰭基部,，極少數(shù)在身體前部,，親魚患病沒有固定部位，全身各自都可出現(xiàn)病灶,。初期下層肌肉出現(xiàn)紅斑,，后鱗片脫落，肌肉腐爛,，病灶的直徑逐漸擴大和濃度加深,，形成潰瘍，嚴重時甚至露出骨骼或內(nèi)臟,。43.草魚出血病,，病毒為呼腸孤病毒,。

有以下三種情況：紅肌肉型、紅鰭紅鰓蓋型,、腸炎型

流行季節(jié)在6月下旬到9月底，水溫20-33度,，最適水溫為27-30度,，流行地區(qū)廣。

診斷方法：腸壁彈性較好,，腸腔內(nèi)黏液較少,，嚴重時腸腔內(nèi)有大量紅細胞及成片脫落的上皮細胞。

防治方法：預防措施：1）清除池底過多的淤泥,，并用濃度200ppm生石灰,，或20ppm漂白粉，或10ppm漂白粉精消毒……

2）使用含氯消毒劑 3）加強饅頭管理,，進行生態(tài)防病,，定期回流清水，潑灑生石灰

4）人工免疫預防：用草魚出血病疫苗進行人工免疫預防本病具有較好的效果（浸泡法和注射法）43.車輪蟲病特點

癥狀：主要寄生在大大鯢幼體的皮膚和鰓上,，以吸取其皮膚和鰓的組織細胞為營養(yǎng),，從而扣件皮膚和鰓組織。幼體鰓絲腫脹充血,，黏液分泌過多時,，影響呼吸和生長。大量感染時身體消瘦,，生長減慢,，流動遲緩，攝食不良,，體表充血,，重癥者可造成死亡

預防：用濃度30毫克/升福爾馬林全池潑灑，8小時后換注新水 治療方法：用濃度30毫克/升的冰醋酸全池潑灑

用濃度0.7毫克/升的硫酸銅,、硫酸亞鐵合劑（5：2）全池潑灑 用100平方米的楝樹新鮮枝葉5千克,，煎煮后全池潑灑

44.九江頭槽絳蟲的生活史：經(jīng)卵、鉤球蚴,、原尾蚴,、裂頭蚴、成蟲5個階段,。

水產(chǎn)動物疾病診斷技術就業(yè)前景篇四

現(xiàn)代生物技術在水產(chǎn)動物疾病診斷上的應用

生命科學與技術學院水產(chǎn)養(yǎng)殖06-4班安海燕0601101401 隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大,，集約化程度的不斷提高，一方面推動了養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā),，增加了經(jīng)濟效益,；另一方面也帶來一個不容忽視的問題－疾病滋生，有嚴重困擾著養(yǎng)殖業(yè)的步伐。如何尋求一種有效的途徑來緩解疾病給養(yǎng)殖業(yè)帶來的危害與損失,，一直是人們所關注的主題,。近些年來，生物技術的蓬勃發(fā)展,，給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來了新的挈機,。國內(nèi)外諸多學者將這一新興科技用于病害防治，取得了不少成果,，并顯示出良好的發(fā)展前景,。水產(chǎn)動物疾病診斷技術的發(fā)展與相應的病原研究的深入程度密切相關，近20年來,，用現(xiàn)代生物學技術檢測病毒,、細菌性病害的發(fā)展迅速，主要有熒光抗體技術,、免疫酶技術,、單克隆抗體技術、核酸雜交技術,、聚合酶鏈反應(pcr)技術等,。由于上述檢測技術的靈敏度高、特異性強,、實用性好等特點,，在國內(nèi)外已成為多種水產(chǎn)動物病毒、細菌等病害的常規(guī)診斷方法,。對鮭鱒魚,、對蝦等的主要病毒和細菌病原的相應免疫學或分子生物學病原檢測技術多數(shù)都開發(fā)成了商品化的試劑盒。

近年來,根據(jù)目前國內(nèi)外研究的動向, 隨著分子生物學技術在水產(chǎn)領域的廣泛應用,，分子生物學技術已經(jīng)體現(xiàn)出極高的應用價值和經(jīng)濟價值,。它對解決水產(chǎn)業(yè)的技術難題、開創(chuàng)新的領域,、改造產(chǎn)業(yè)的傳統(tǒng)模式起著十分重要的作用,。包括我國在內(nèi)的許多國家都在大力研發(fā)與水產(chǎn)業(yè)有關的分子生物學技術，并著力于開發(fā)新的優(yōu)良養(yǎng)殖種類,、培育高產(chǎn)抗逆的良種以及探尋檢測和防治病害的新技術,、新方法等。因此應用分子生物學技術進行水產(chǎn)養(yǎng)殖品種的疾病診斷領域具有強大的發(fā)展?jié)摿?。目前生物技術在水產(chǎn)養(yǎng)殖病原體檢測上的應用,，我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)尤其是蝦類、貝類,、魚類受到病原微生物的侵擾十分嚴重,，如何對水產(chǎn)動物疾病進行快速,、準確的預報與診斷，是擺在養(yǎng)殖業(yè)面前的第一道門坎,。近些年來,，生物技術的發(fā)展已為病原體的檢測提供了快速、高效,、靈敏的技術手段,。

同時，免疫學快速診斷技術是一項特異,、敏感和簡便的技術，廣泛應用于許多領域,，尤其在生物醫(yī)學的理論研究和臨床診斷方面更是發(fā)揮了不可替代的作用,。其主要包括血清凝集試驗，免疫熒光抗體和免疫酶標技術在水產(chǎn)動物疾病診斷上的應用具有靈敏度高,、特異性強,、定位準確和應用廣泛等優(yōu)點。現(xiàn)代生物技術結合免疫學對免疫檢測技術,、核酸檢測技術,、核酸技術與免疫學相結合方法等 1

進行了研究與應用。

單克隆抗體

單克隆抗體是由單個細胞傳代所產(chǎn)生的高純度,、高特異性的抗體,。它與常規(guī)血清抗體相比，具有更強的特異性與針對性,，且制備簡單,，因而在病原檢測中得以廣泛應用。80年代后期,，已成功研制出傳染性胰腺壞死病毒,、出血病毒等單克隆抗體，并用于魚類多種疾病的診斷,。近年來,。有學者已成功制備了抗鰻弧菌的單抗和抗嗜水氣單胞菌的單抗。我國在單克隆抗體技術中,，將其應用于檢測草魚出血病毒和對蝦白斑病毒,，均獲得了較為

酶聯(lián)免疫吸附

酶聯(lián)免疫吸附檢測(elisa)是將抗原或抗體吸附在載體表面，通過酶與底物顯色來檢測特異性抗原或抗體的技術,。該技術具有反應迅速,、特異性強、靈敏度高等特點,。目前,，elisa在魚類病原體檢測上的應用較廣,，國內(nèi)諸多學者將此技術用于疾病檢測上，如李煥榮等(1997)應用dot－elisa快速檢測出了嗜水氣單胞菌的致病因子胞外蛋白酶ahecpase54,；黃?(1995)應用單克隆抗體酶聯(lián)免疫技術檢測到了對蝦皮下及造血組織壞死桿狀病毒,；陳懷青等(1993)應用dot－elisa檢測到了魚類致病性嗜水氣單胞菌hec毒素。國外對此項技術的研究較國內(nèi)早,，廣泛用于對癤瘡病,、紅嘴病、細菌性腎臟病以及愛德華菌病等的快速檢測與診斷,。此外,，noel等將elisa用于菲律賓哈上，成功檢測出了弧菌pi滿意的效果,。

核酸探針

核酸探針是指利用特定標記的dna或rna探針與病原生物中的與探針互補的靶核苷酸序列進行雜交,，以此來確定宿主是否攜帶病毒的一類分子生物學技術。該方法以其靈敏度高,、特異性強,、簡便快速等特點，在病原檢測中倍受青睞,。futo,，hiney(1992)將此技術應用診斷細菌性魚病，comps等(1996)采用地高辛標記的rna探針檢測fev病毒在魚類中的表達,，bruce等(1994)利用dna探針檢測對蝦桿狀病毒,。日本學者也采用地高辛標記的dna探針進行菌落雜交，用于鰻弧菌的鑒定,。我國學者對導致我國對蝦大規(guī)模死亡的病原－皮下及造血組織壞死桿狀病毒(hhnbv),，已成功研制出核酸探針試劑盒，用于蝦病的診斷,。該法簡便快捷,，操作性強，已獲國家專利,。

聚合酶鏈反應

酶鏈反應(pcr)技術是指在引物的指導下,，體外酶促反應，迅速擴增dn**段的一種方法,。該法反應十分迅速,，幾小時內(nèi)便可擴增到108－10倍，因而pcr技術具有高度的靈敏性,。目前pcr在水產(chǎn)動物病原的操作中,，已成功應用于毛蛤甲肝病毒，對蝦桃拉病毒,、的檢測白斑病毒等,，并研制出了診斷白斑病毒的檢測試劑盒,，可用于幼蝦、成蝦以及親蝦的帶毒檢測,，同時還可對養(yǎng)殖環(huán)境中的宿主,、底質(zhì)、餌料等進行檢測,。另外有學者也報道了應用pcr技術檢測貝類腸道病毒以及周圍水體內(nèi)的病菌等,。

pcr與其他技術的聯(lián)用

pcr不僅自身可以用來檢測病原體,也可以與其他技術相結合充分發(fā)揮其優(yōu)點。例如sukhum-sirichart等(2002)通過在反應體系中加入地高辛標記的dutp,采用將pcr和酶聯(lián)免疫吸附試驗相結合(polymerase chain reaction-enzyme-linked-immuno-sorbent assay,pcr-elisa)從蝦中檢測出了對蝦肝胰腺細小病毒(hepatopancreatic par-vovirus,hpv),通過比較實驗,說明其靈敏度是southern雜交(southern hybridization)的10倍,是常規(guī)pcr的20倍,。該法避免了pcr中使用溴化乙錠的缺點,但是它也有實驗成本較高的缺點,。schwab等采用一種從嗜熱菌thermus thermophilus中提取出的耐熱性的同時具有反轉錄酶和聚合酶活性的酶rtth,與rt-pcr結合建立了deia(dnaenzyme immunoassay)法檢測出了諾沃克樣病毒(nor-walk-like viruses,nlvs),由于該法的結果是用數(shù)字表示的,這樣也避免了電泳和southern雜交時人的主觀判斷。del ophilum.,。heath等等利用競爭pcr擴增魚類的一種病原體piscirick-ettsia salmonis的核糖體rna基因間(internal tran-scribed spacer,its)的部分序列,并用dgge(變性梯度凝膠電泳)檢測到了結果,。

16s rrna技術

16s rrna是核糖體rna的一種，具有分子量適中,、所含的遺傳信息豐富等特點。在結構上分為保守區(qū)（conserved domain）和可變區(qū)（variable domain）,。保守區(qū)能反映生物物種的親緣關系,，可變區(qū)能揭示生物物種的特征核酸序列，被認為是最適細菌系統(tǒng)發(fā)育和分類鑒定的指標,。目前16s rrna序列分析已廣泛用

于水產(chǎn)動物病原菌的鑒定,。ragnhild等（1995）通過對分離于大西洋鮭魚、虹鱒魚,、大菱鲆和鱈魚中的致病弧菌的16s rrna序列進行比對,，對魚類致病弧菌進行分類。carlos等（1999）通過對26株不同來源的魚病菌的16s rrna基因序列的分析,，確定了魚出血性敗血病血癥病原美人魚發(fā)光桿菌的分類地位,，并建立了基于16s rrna基因的巢式pcr病原檢測方法。cerda等（2001）icus 病毒進行檢測,。鄒玉霞等（2004）通過對大菱鲆出血癥病原菌的16s rrna 基因進行系統(tǒng)發(fā)育學分析,，確定了該病原菌為鰻弧菌。耿毅等（2006）從發(fā)生急性流行性傳染病的斑點叉尾魚回肝臟,、腎臟分離到一高致病性的菌株,，經(jīng)16s rrna序列分析，鑒定其為嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌,。

細胞培養(yǎng)

當前,，動物細胞培養(yǎng)也作為一類技術用于水產(chǎn)動物病原體的檢測。如lu等(1995)應用對蝦淋巴器官原代培養(yǎng)細胞檢測對蝦黃頭桿狀病毒(ybv),。此外,，水產(chǎn)動物細胞培養(yǎng)也可用于篩選抗菌藥物,、培育新型品種以及生產(chǎn)各類疫苗和免疫制劑等。

限制性酶酶切檢測

限制性酶可識別dna上較短的序列,，在識別位點上切開dna,，單個核苷酸變化即可導致限制性酶切位點的增加或缺失。因此,，酶切后產(chǎn)生的片段數(shù)目發(fā)生了改變,，即所謂的限制性片段長度多態(tài)性(rflp)。根據(jù)酶切后的dna片段在凝膠電泳上進行分離,，染色后即可觀察各個不同大小的片段,，進行遺傳變異的分析。這種診斷對于病原微生物是相當有效而直接的方法,。如katja einer-jensen等通過rflp技術分析魚體棒狀病毒血紅素敗血病病毒的基因型,。

熒光抗體技術

熒光抗體技術是根據(jù)抗原抗體具有高度特異性的反應，把熒光素作為抗原標記物,，在熒光顯微鏡下檢查呈現(xiàn)熒光的特異性抗原復合物及其存在部位,，在水產(chǎn)動物病原體的檢測上得到了一定的應用。鄢慶枇等應用熒光抗體技術檢測牙鲆體內(nèi)的弧菌,。

近半個世紀以來,，隨著水產(chǎn)動物疾病研究廣泛地與其它先進技術手段相結合，尤其與分子生物學技術的結合,，為水產(chǎn)動物疾病快速診斷技術的研發(fā)帶來了

福音,。快速準確的病原體檢測手段,，高效免疫疫苗的制備都在很大程度上緩解了病害所帶來的嚴重損失,。然而目前許多快速診斷技術都處實驗室研究階段，將這些快診技術應用于生產(chǎn),，還有待于條件方法的優(yōu)化以及儀器設備成本的降低,。隨著研究的深化，水產(chǎn)動物疾病的快速診斷技術也在不斷向前發(fā)展,，基因芯片（又稱dna芯片）技術的研發(fā)也漸有突破,。日本水產(chǎn)綜合研究中心已經(jīng)成功開發(fā)出利用dna晶片快速診斷魚類細菌性疾病的新技術，利用dna晶片的診斷法與過去只能檢出特定病原菌的pcr法或培養(yǎng)法相比,，不但在檢察時間或步驟上縮短許多,，在成本上也比較便宜。利用該技術,，以往被歸為不明原因的細菌性疾病也能在一次的診斷中檢測出來,。應用基因芯片技術快速診斷技術確實是一種敏感性強、精確度高的有效檢測手段。

國際上正在著手建立水產(chǎn)病害檢疫網(wǎng)絡和規(guī)范,，其相關的病原快速檢測技術將得到不斷完善并規(guī)范化?，F(xiàn)代免疫學、分子生物學和生物化學等高新生物技術,，如核酸探針,、pcr、熒光抗體檢測技術,、酶聯(lián)免疫技術等在疾病診斷和病原生物檢測中將得到廣泛應用,，技術的商品化程度將大大提高。對病原生物核酸序列的掌握為核酸探針和pcr引物的人工合成提供越來越多的便利,。借助上述手段,，檢測技術將能精細到對病原分類分型鑒定和致病因子的測定。